技术课堂｜蛋白表达的工具：瞬时转染技术详解（上）

蛋白表达的工具瞬时转染技术详解（上）Cell Culture and Beyond随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染（Transfection）已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。转染通常用于生产重组蛋白和增强或抑制特定基因表达。随着用户对重组蛋白的高效生产和对各类细胞进行多样化的基因功能调控的需求，用户不仅要求转染方法高效、安全、低细胞毒性，还要求其简单、省时和经济。本文将介绍转染的定义、分类、方式和瞬转效率的影响因素，帮助您更了解转染技术，从而找到满足您实际需求的转染方法。01转染的定义将外源基因导入细胞，从而研究细胞基因功能和蛋白质表达调控的一种方法。02转染的分类转染的方式分为稳定转染（稳转）和瞬时转染（瞬转）两种，二者最主要的区别为外源基因是否整合入宿主基因组中。图1 稳转和瞬转的区别示意图(A) 稳转; (B) 瞬转表1 转染的分类03转染方式转染的方式可分为化学介导、物理介导和生物介导三类。具体的分类如下图所示。图 2 转染方法分类目前，广泛使用的转染方法有阳离子聚合物转染、阳离子脂质体转染、电穿孔和慢病毒介导。这些方法在原理、特点和适用范围上均有所差异，用户可根据实际的实验需求进行选择。表2 常用转染方法的原理、特点和应用范围本期内容涵盖了转染的定义、分类和转染方式的对比。下一期小编将会为大家详细介绍影响转染效率的各项因素，帮助您提高转染效率。- 参考文献 -[1] Kim T K, Eberwine J H. Mammalian cell transfection: the present and the future[J]. Analytical & Bioanalytical Chemistry, 2010, 397(8):3173-3178.[2] Abhijeet P. P, Krutika K. S. Polyethylenimine: A versatile, multifunctional non-viral vector for nucleic acid delivery[J]. Materials Science and Engineering C, 2016, 68:904-918.[3] Thomas M, Lu J J, Ge Q, et al. Full deacylation of polyethylenimine dramatically boosts its gene delivery efficiency and specificity to mouse lung[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2005, 102(16):5679-5684.[4] Aaron H, Fuxing T, Jeffrey A. H. Cationic Lipid Vectors for Plasmid DNA Delivery[J]. Current Medicinal Chemistry, 2003, 10, 1185-1193.[5] Marie M, Catherine P, Arnaud V, Anne C, Jean-Pierre B. Progress in developing cationic vectors for non-viral systemic gene therapy against cancer[J]. Biomaterials, 2008, 29(24-25):3477-3496.- 关于我们 -上海奥浦迈生物科技股份有限公司（股票简称：奥浦迈；股票代码：688293）成立于2013年，于2022年登陆科创板，是一家专注于提供细胞培养解决方案和端到端CDMO服务的高科技生物技术公司。奥浦迈拥有4个符合GMP标准的生产基地（包括在建），总面积超18,000平方米，另有总面积约30,000平方米的新总部正处于建设阶段。凭借卓越的产品性能及高质量的服务，公司已累计为全球120+临床前后及商业化生产阶段的生物药项目提供培养基。同时，圆满交付200+个生物药开发、生产项目，并成功帮助全球合作伙伴通过中美IND申报。-联系我们-联系电话：4000-688-293地址：上海市浦东新区紫萍路908弄28号楼邮箱：service@opmbiosciences.com网址：http://www.opmbiosciences.com扫描二维码，关注奥浦迈服务号