甲亢小鼠模型构建反复失败？Ad-TSHR高效建模策略全解析

甲状腺功能亢进症（简称甲亢）是内分泌领域最常见的疾病之一，核心特征是血液循环中甲状腺激素过量，引发全身代谢亢进与交感神经兴奋，临床常表现为心悸、手抖、多汗、消瘦、易怒等一系列症状。甲亢并非单一病因导致的疾病，而是一组临床综合征。

格雷夫斯病（Graves病）是甲亢最常见病因，约占80%的病例。Graves病是一种自身免疫性疾病，患者产生针对促甲状腺激素受体（TSHR）的自身抗体（TRAb），其中刺激性抗体（TSAb）可模拟促甲状腺激素作用，与TSHR结合持续激活甲状腺细胞，导致T3/T4升高并反馈抑制垂体TSH分泌。Graves病的发生受遗传和环境因素共同影响，遗传易感性约占70%–80%，涉及HLA-DR3、CTLA-4、CD40、PTPN22、TSHR等基因，环境因素包括感染、碘摄入异常、精神压力及吸烟，可通过抗原释放或免疫失衡触发疾病。

动物模型是解析人类疾病发病机制、筛选治疗方案的核心工具，其能精准复刻病理特征，为基础研究与临床转化搭建关键桥梁。

Graves病动物模型发展

非自身免疫性甲亢模型

通过外源补充甲状腺激素（如L-T4）建立，可模拟代谢亢进，但不涉及TSHR自身免疫，无法复制Graves病病理。

TSHR表达细胞模型（Shimojo模型）

1996年，Shimojo等用TSHR和MHC II转染的成纤维细胞反复免疫小鼠，成功建立Graves样模型，表现为TSAb产生、T4升高及甲状腺肿大。

腺病毒（Ad-TSHR）模型

2002年，Nagayama等首次报道利用表达全长TSHR的重组腺病毒（Ad-TSHR）免疫BALB/c小鼠，通过多次肌肉注射成功诱导TRAb产生及甲状腺功能亢进表型。随后，Chen、McLachlan和Rapoport团队进一步开发了表达TSHR A亚基（TSHR289）的腺病毒模型，显著提高了TRAb阳性率和甲亢诱导效率。在部分研究条件下，该模型还可观察到类似Graves眼病的眼眶组织病理改变。

TSHR DNA电转模型

近年来，研究者将TSHR A亚基质粒通过肌肉注射+电转导入小鼠肌细胞，诱导持续TSHR表达，从而刺激免疫系统产生TRAb/TSAb，出现T4升高及甲状腺增生。DNA电转模型安全性高，但建模周期相对较长，且需要电转设备。

模型选择与腺病毒优势

尽管DNA电转模型近年来应用广泛，但Ad-TSHR模型建模效率高、诱导TRAb重复性好，无需电转设备，操作简便，因此仍是目前应用最广泛的Graves病模型构建策略之一。

Ad-TSHR模型构建过程

??小鼠品系选择：BALB/c雌性小鼠是目前最常用、诱导效率最高的品系

??注射方式：大腿肌肉注射

??注射剂量：～1E11 PFU

??免疫方案：每次注射间隔三周，共三次；第二次注射后一周采集血清用于TRAb/T4测定

??终点采样：第三次注射后4–8周收集血液及甲状腺组织

??检测指标：血清T4/T3测定；TRAb/TSAb滴度检测；甲状腺组织大小及滤泡增生病理观察；免疫反应随时间变化监测

图 ADV-TSHR诱导Graves病小鼠模型的作用机制示意图

和元助力

在实际建模过程中，除小鼠品系和免疫方案外，研究人员通常还需要关注载体设计、病毒制备质量及表达效率等因素，这些因素可能影响TSHR抗原表达水平及后续免疫应答，从而影响模型稳定性和实验重复性。和元生物提供Ad-TSHR载体构建、病毒包装及滴度检测服务，可帮助研究者高效稳定完成Graves病小鼠模型，同时提供动物造模、病理分析及药效评价的全流程技术支持。

常见Ad-TSHR载体??

和元518·火热进行中

参考文献

1. Weetman AP. Graves' disease. N Engl J Med. 2000 Oct 26;343(17):1236-48. doi: 10.1056/NEJM200010263431707.

2. Shimojo N, Kohno Y, Yamaguchi K-I, et al. Induction of Graves-like disease in mice by immunization with fibroblasts transfected with the thyrotropin receptor and a class II molecule. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996;93:11074–11079.3. Nagayama Y, Kita-Furuyama M, Ando T, et al. A novel murine model of Graves' hyperthyroidism with intramuscular injection of adenovirus expressing the thyrotropin receptor. J Immunol. 2002;168(6):2789-2794.

4. Chen CR, McLachlan SM, Rapoport B. Susceptibility rather than resistance to hyperthyroidism is dominant in BALB/c mice immunized with adenovirus expressing the thyrotropin receptor. Endocrinology. 2004;145(11):4927-36.

5. McLachlan SM, Rapoport B. DNA immunization for induction of Graves' disease in mice. Clin Dev Immunol. 2005;12(1):43-51. doi:10.1080/17402520500126103.

6. Moshkelgosha S, et al. Induction of Graves’ disease in mice by DNA immunization and electroporation. Autoimmunity. 2013;46(6):383-392. doi:10.3109/08916934.2013.809847.

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