做逆转录最怕什么?
辛辛苦苦提完RNA,还要单独做gDNA去除,多一步就多一个风险点;
基因组残留没清干净,下游结果出来也不敢信,假阳性让人怀疑人生;
遇到低丰度基因,逆转录效率一掉链子,扩增曲线、条带都惨不忍睹……
你的实验,值得更好的cDNA
近岸蛋白推出新一代5 min快速逆转录预混液——NovoScript? All-in-one RT UltraMix Pure for qPCR(Cat.No.:E547),一份预混液同时搞定基因组DNA去除与逆转录,让cDNA合成更简单高效。
四大核心优势
01 一管式5分钟,去gDNA+逆转录同步完成
02 只切gDNA,不伤引物与cDNA,酶灭活零残留
03 5×预混液,灵敏度低至1 pg模版,低浓度珍稀样本轻松应对
04 4℃放置40天,反复冻融30次,性能稳定
性能展示
01 快速5 min逆转录
图1. 以293T细胞总RNA为模板,使用E547进行逆转录,得到的cDNA用E401进行qPCR定量分析。结果显示,不同逆转录时间处理ΔCt<0.5,表明E547在快速5 min和常规20 min时间下均表现出良好的逆转录效率。
注:△Ct= Ct(其他品牌逆转录产品)– Ct(Novoprotein E547)
图2. 以不同基因、不同物种的总RNA为模板,使用Novoprotein E547及其他同类产品同时逆转录,得到的cDNA用E096进行qPCR定量分析。结果显示,E547在不同基因、不同物种条件下均获得更小的Ct值,逆转录效率优于同类产品。
03 耐抑制性高
图3. 以293T细胞总RNA为模板,实验组添加80 μM异硫氰酸胍,使用Novoprotein E547及其他同类产品同时逆转录,得到的cDNA用E096进行qPCR定量分析。结果显示,实验组和对照组中,E547 的Ct值均小于同类产品,耐抑制性优于同类。
04 灵敏性最低可达1 pg
图4. 以293T细胞总RNA为模板,使用E547进行逆转录,得到的cDNA用E401进行qPCR定量分析。结果显示,E547可成功逆转录低至1 pg的总RNA。
05 稳定性强
图5. E547在37℃条件下放置7天,4℃条件下放置42天,反复冻融30次,性能均保持稳定,△Ct<0.5。结果表明,产品稳定性强。(FTC1:冻融1次;FTC30:冻融30次)
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