上新 | 成功率翻倍的qPCR黑科技—紫韵万象，出色登场！

诺唯赞SupRealQ系列产品，通过BioSmart平台，以高扩增性能为标准筛选核心酶，匹配双物种抗体高封闭技术，能够稳定扩增更多复杂模板，以减少体系调整的重复工作量，提高实验效率。

在实验过程，我们往往有一些较低表达量基因的检测需求，这些基因在qPCR扩增过程会伴随着CT值30以上、熔解曲线峰形不单一、复孔重复性差的现象，不能真实体现基因表达情况，数据也无法使用，需要通过重新设计引物或者更换基因来解决。

Vazyme #Q713通过BioSmart平台定向筛选扩增性能优异的核心酶，以达到对低丰度表达基因的有效扩增，获得基因真实的表达数据，降低了扩增难度，减少了重新更换基因和引物的工作量。

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使用Vazyme #Q713对293 cDNA进行不同基因相同反应体系，出现某些基因CT值落后于其他基因的情况（如下图基因1，基因2，基因3所示），将这种情况下的基因定义为相对低丰度表达基因。

其中基因3使用Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A进行扩增。结果显示，Vazyme #Q713在该类低丰度表达基因中灵敏度优于Supplier A，且能够保证扩增产物的高特异性。

图1. Vazyme #Q713对低表达基因的扩增效果

当样本由于存放或提取不当发生降解后，直接导致有效扩增模板数量减少，增加扩增难度。实验表明，对一定程度降解的样本，Q713依然能够实现有效扩增。

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在凡纳滨对虾胰腺组织提取RNA后进行核酸电泳，电泳图中无清晰条带，提示该样本存在一定降解。将RNA降解样品逆转录为cDNA，cDNA进行连续2倍稀释3个梯度，使用Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A扩增对虾基因（机型：ABI QuantStudio 3）。结果显示，与Supplier A相比，Vazyme #Q713在降解样本中仍能稳定扩增，同时扩增效率满足MIQE（The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments）认为的90 - 110%可信区间。

图2. Vazyme #Q713对一定程度降解样本的扩增效果

高GC的模板区域扩增DNA模板难解链，以及低GC的模板区域扩增引物退火效率不够都会直接导致扩增效果不理想，Vazyme #Q713通过酶和buffer的配合能够在更大范围的兼容高低GC模板，减少扩增体系调整带来的工作量。

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以293 gDNA为模板，使用 Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A扩增不同GC含量基因4和基因5（机型：ABI QuantStudio 3）。结果显示，Vazyme #Q713灵敏度及特异性均优于Supplier A。

图3. Vazyme #Q713对高低GC序列的扩增效果

难扩体系，无需担忧！Vazyme #Q713针对复杂体系扩增精心打造，实验难题迎刃而解！

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